总巯基检测试剂盒(DTNB法) / Total Thiol Assay Kit with DTNB

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¥ 618.00

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MCK-0038-500T

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总巯基检测试剂盒(DTNB法)，即Total Sulfhydryl Assay Kit with DTNB或Total Thiol Assay Kit with DTNB，也称总游离巯基检测试剂盒、总巯基含量检测试剂盒或总巯基定量检测试剂盒，是一种高效、便捷的用于细胞培养上清液、血清、血浆、细胞及组织裂解液样品中总游离巯基含量的检测试剂盒，即暴露的或表面的游离巯基(Exposed/Surface free sulfhydryl groups)和埋藏于蛋白内部的游离巯基(Buried free sulfhydryl groups)的检测试剂盒。本试剂盒采用显色法(吸光度法)进行检测。本试剂盒采用经典的基于DTNB的游离巯基定量检测方法。5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸) (5,5'-Dithio-bis-(2-nitrobenzoic acid), DTNB)，又称为6,6′-二硝基-3,3′-二硫代苯甲酸、Ellman试剂(Ellman Reagent)、二硫代硝基苯甲酸或双(3-羧基-4-硝基苯基)二硫，是一种与巯基相互作用的水溶性试剂，可用于组织、蛋白质和多肽中游离巯基含量的测定，基本反应原理如下：样品中的蛋白质通过变性处理，原有构像发生改变，蛋白质肽链松散开，从而使原来埋藏于蛋白质内部的巯基(-SH)暴露，所有游离巯基(R-SH)与DTNB反应生成黄色可检测的2-硝基-5-硫代苯甲酸盐阴离子(TNB)和混合二硫化物(R-S-TNB)，TNB在412nm处有强吸收峰，通过酶标仪测定此处的吸光度，并以谷胱甘肽为标准品，可计算出样品中总游离巯基含量。本试剂盒可同时检测暴露的或表面的游离巯基以及在蛋白质高级结构中的游离巯基。

本试剂盒样品处理简单，检测速度快。对于细胞培养上清液、血清、血浆可直接检测；对于细胞及组织样品只需匀浆裂解，取上清进行检测。整个检测过程不足半小时即可完成。

本试剂盒的Assay Buffer经过优化，可螯合可以氧化巯基的二价金属离子，防止样品被氧化导致样品中巯基含量低于实际值。

本试剂盒提供了检测所需的DTNB和Assay Buffer，同时还提供GSH作为标准品或阳性对照(Positive control)。最低检测限约为10μM。

本试剂盒适用于检测细胞培养上清液、血清、血浆、细胞及组织裂解液样品中总游离巯基含量。

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